1 材料與方法
1.1 供試菌株
試驗所用菌株取自于成都某污水處理廠(chǎng)沉淀中的活性污泥，經(jīng)本實(shí)驗室分離并保存。
1.2 實(shí)驗用水
試驗中所使用的廢水為成都市某酒廠(chǎng)生產(chǎn)過(guò)程中所產(chǎn)生的制酒廢水，其水質(zhì)參數為：還原糖20.80g/L，COD濃度為90000mg/L，pH3.6。
1.3廢水發(fā)酵培養基及斜面培養基
將制酒廢水進(jìn)行適當稀釋?zhuān)匆欢ǖ腃/N比加入氮源，121℃滅菌30min后制成廢水發(fā)酵培養基，用于絮凝劑的合成；將廢水稀釋10倍，按C/N比20：1的發(fā)酵培養基成分加入瓊脂20g/L，121℃滅菌30min后制成廢水斜面培養基，用于菌種保存。
1.4實(shí)驗方法
1.4.1絮凝劑產(chǎn)生菌培養條件優(yōu)化
將篩選出的細菌菌株按10%的相對接種量（V/V，菌體濃度：108個(gè)/L）分別接種于不同氮源種類(lèi)、C/N比廢水發(fā)酵培養基中，在搖床轉速為120r/min，培養溫度為30℃的條件下培養后取10mL發(fā)酵液經(jīng)離心后測定其上清液的絮凝率。
1.4.2絮凝率測定方法
按照《水的混凝及絮凝杯罐試驗方法GB/T 16881—1997》，并根據實(shí)際情況作修改。具體為：200mL燒杯中依次加入高嶺土懸濁液（1g/L）93mL，1%CaCl2溶液5mL,，絮凝劑2mL，將pH值調至7.0左右，然后將燒杯置于電動(dòng)攪拌器下，吸取其上清液于分光光度計波長(cháng)為550nm處測定其吸光度OD550，以等體積的蒸餾水作為對照，以絮凝率（FR）表示絮凝活性。
FR計算公式如下：FR=（A—B）/A×100%
式中，A為對照樣上清液550nm處的吸光度；B為絮凝后上清液550nm處的吸光度。
1.4.3 菌株鑒定
在堿性條件下，用表面活性劑SDS將細菌細胞壁破裂，然后用高濃度的NaCl沉淀蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，經(jīng)過(guò)氯仿抽取進(jìn)一步去掉蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，經(jīng)乙醇沉淀，得到較純的總DNA，測序結果進(jìn)行Blastn同源性檢索和相似性分析。
2 結果與討論
2.1 細菌類(lèi)絮凝劑產(chǎn)生菌培養條件優(yōu)化
2.1.1 不同氮源對細菌合成絮凝劑的影響
文章來(lái)源華夏酒報一般有機氮的成本較高，為降低微生物絮凝劑的生產(chǎn)成本，以尿素和硫酸銨作為培養基添加氮源，考察氮源對絮凝活性的影響。
從結果可以看出，無(wú)機氮源作為細菌生長(cháng)和絮凝劑合成的外加氮源，能夠促進(jìn)細菌的生長(cháng)和絮凝劑的合成。
2.1.2 C/N對細菌合成絮凝劑的影響
C/N對比會(huì )直接影響微生物的生長(cháng)繁殖和代謝產(chǎn)物的積累。將5株細菌類(lèi)絮凝劑產(chǎn)生菌在碳氮比為5：1—30：1的制酒廢水發(fā)酵培養基中培養40h后，取樣測定其絮凝活性。
5株細菌都在C/N15：1—25：1時(shí)有較大的絮凝活性，且能在此范圍內基本保持穩定。
2.1.3 發(fā)酵時(shí)間對細菌合成絮凝劑的影響
微生物成長(cháng)分適應期、加速期、對數期、減速期、靜止期和衰亡期6個(gè)時(shí)期。這5株細菌類(lèi)絮凝劑產(chǎn)生菌的較大，絮凝活性分別出現在發(fā)酵為32h或40h。
2.1.4單株細菌最佳絮凝劑合成條件的確定
由于X15相對于其他4株細菌來(lái)說(shuō)，具有更好的絮凝活性，而且在各次實(shí)驗中的穩定性較好，故對其進(jìn)行正交實(shí)驗。
各因素對X15菌株合成絮凝劑影響程度的順序為：培養基初始pH>碳氮比>廢水COD濃度>氮源種類(lèi)。從該絮凝劑產(chǎn)生菌的最佳合成條件為：尿素為氮源，培養基初始pH值為8.0，碳氮比為15：1，COD濃度為9000mg/L。
2.2 X15的生理生化特性
X15菌株生理生化指標鑒定結果可以看出，X15革蘭氏染色為陽(yáng)性，能夠在厭氧條件下生長(cháng)，對乳糖反應表現為陰性，其余反應都表現為陽(yáng)性。
絮凝劑有不少品種，其共通特點(diǎn)是能夠將溶液中的懸浮微粒聚集聯(lián)結形成粗大的絮狀團�；驁F塊。 絮凝劑按照其化學(xué)成分總體可分為無(wú)機絮凝劑和有機絮凝劑兩類(lèi)。其中無(wú)機絮凝劑又包括無(wú)機凝聚劑和無(wú)機高分子絮凝劑;有機絮凝劑又包括合成有機高分子絮凝劑、天然有機高分子絮凝劑和微生物絮凝劑。
絮凝劑主要是帶有正電（負)性的基團中和一些水中帶有負(正）電性難于分離的一些粒子或者叫顆粒，降低其電勢，使其處于不穩定狀態(tài)，并利用其聚合性質(zhì)使得這些顆粒，集中，并通過(guò)物理或者化學(xué)方法分離出來(lái)。一般為達到這種目的而使用的藥劑，稱(chēng)之為絮凝劑。絮凝劑主要應用于給水各污水處理領(lǐng)域。
有機無(wú)機復合絮凝劑以品種多樣和性能多元化占主導地位。作用機理主要與協(xié)同作用相關(guān)。無(wú)機高分子成分吸附雜質(zhì)和懸浮微粒,使形成顆粒并逐漸增大;而有機高分子成分通過(guò)自身的橋聯(lián)作用,利用吸附在有機高分子上的活性基團產(chǎn)生網(wǎng)捕作用,網(wǎng)捕其它雜質(zhì)顆粒一同下沉。同時(shí),無(wú)機鹽的存在使污染物表面電荷中和,促進(jìn)有機高分子的絮凝作用,大大提高絮凝效果。我國無(wú)機高分子絮凝劑的生產(chǎn)和應用已取得長(cháng)足進(jìn)展,最具有代表性的聚合氯化鋁和聚合liusuan鐵的研究,已居世界前列
